1、你们转染试剂的转染范围是那些？

答：Polyfectine转染试剂是百恩维生物公司（Biowit Technologies）最新研发合成的新型纳米聚合物高效转染试剂，既可以感染分裂细胞也可以感染非分裂细胞。可用于In vivo动物体内的转染，更可以用于悬浮培养细胞（如293-F、CHO-S等）的高效转染。

HET是百恩维开发专用于病毒包装的转染试剂，UES专用于电转染。

2、你们转染试剂的稳定性如何？

答：百恩维的转染试剂一般通过常温运输，并在4 °C下保存。在正确地存储和使用的前提下，百恩维保证产品自购买之日起六个月内性能完好。

3、我在哪里看到你们的说明书和报价？

答：您可以登录百恩维官方网站：http://www.biowit.com.cn/cat-17-1-g.html。查看报价，点击查看具体介绍，可在产品界面页面下载说明书。

4、百恩维转染试剂可使用次数是多少？

答：转染试剂的使用次数取决于细胞种类以及需要转染的物种。就293F细胞而言，1ml的Polyfectine可用于125次6孔板转染；2500次96孔板转染，每孔转染成本不足0.5元。是目前市面上性价比最高的主流转染试剂。

5、细胞代数和融合度对转染效果有影响吗？

答：传代次数可能影响转染实验。我们建议在细胞分瓶和铺板实验操作时要保持一致性。 传代次数过多可能会降低转染效率。 如果转染效率开始降低，并且所用细胞已培养很长时间、传代过多、或有过不适当的传代操作，我们建议复苏于液氮中保存的细胞重新开始培养。

整体而言，融合度越高，对于转染效果越好。转染细胞的融合度要求保持90%~95%，此时Polyfectine的转染效率保持最高水平。

6、转染时是否可以使用含血清培养基？

答：使用百恩维转染试剂进行转染时，有无血清并无影响。

7、转染时培养基可以加入抗生素吗？

答：我们实验证实，转染时培养基添加了青霉素和链霉素，对转染效果会有一定影响。毕竟转染时使用抗生素可能会增加细胞死亡率。为了保证最佳转染效果，建议转染时不要加入抗生素。对于稳定转染，也要在转染后至少 72 小时再加入筛选用抗生素。

8、百恩维的转染试剂可以转染那些类型的因子？

答：DNA、RNA、SiRNA。转染的 DNA 可以是质粒、粘粒。

9、百恩维的转染试剂可用于共转染质粒吗？ 我可以共转染质粒和 siRNA 吗？

答：可用于共转染质粒，共转染质粒和 siRNA是完全可行的。

10、对于 RNAi 应用，百恩维推荐何种转染试剂？

  答：最佳选择无疑是Polyfectine！

11、我使用的孔尺寸与方案中的要求不同， 我该如何放大或缩小转染反应？

答：我们的每种转染试剂的说明书均附有孔尺寸表，您可以根据孔面积大小以及使用DNA的量，转染细胞种类放大或缩小。

12、我是否可以对不同的细胞系使用相同量的转染试剂？

答：请参考转染试剂随附的产品信息来进行实验优化。在大多数情况下，产品随附的转染方案提供了每孔所用转染试剂量的最佳范围。这个转染试剂使用量范围在产品研发过程中已证明适用于多种细胞系。 如果对某种细胞系仍然没有达到理想的效果，可能需要进行进一步优化。 如果需要更多帮助以优化方案，请联系技术支持部info@biowit.com。

13、为什么我的转染效率较低？

答：

1）优化条件：对大多数质粒或DNA/RNA片段，我们推荐的质粒或DNA/RNA片段与Polyfectine的质量比优化条件是1：2－3, 但这是一般情况，质粒不同，所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种特殊情况需要对质粒转染试剂的配比进行优化。

2）抑制剂：不要在用于制备DNA-转染试剂复合物的培养基中使用抗生素，EDTA，柠檬酸盐，磷酸盐，RPMI，硫酸软骨素，透明质酸，硫酸葡聚糖或其他硫酸蛋白多糖。

3） 细胞状态及融合度：长势旺盛的细胞转染效果更佳，细胞密度应该在转染时融合度至少70%以上。

4）DNA纯度及数量：确保质粒OD值A260/A280 在1.8~2.0之间。DNA量不能太高，单独DNA也会对细胞生长有一个基础的影响。

14、对于成纤维细胞和干细胞你们有何建议？

答：成纤维细胞用电转染效果更佳，我们有相应的电转染试剂UES。该试剂可支持成纤维细胞50%以上的电转染效率。干细胞是目前最常用病毒介导方法，百恩维提供多种现成病毒，也可以提供个性化的病毒包装服务。

15、可以转染悬浮细胞吗？

答：Polyfectine转染悬浮细胞效果非常好。

16、百恩维转染试剂得到更高的蛋白表达？

答：绝对是的！转染，自然就希望得到更好的表达。Polyfectine 更优于其他转染试剂，特别在于它能令细胞表达水平更高，表达时间更长！特别是在HeLa, NIH/3T3, COS-1, COS-7, CHO-K1, CHO-S, Hep G2, HEK-293, MCF-7,昆虫细胞株High Five，Sf9等细胞中表达量显著提高。

17、转染试剂应用范围如何？

答：Polyfectine不含动物来源成分，令实验适用范围更广，在特殊实验需要时你也不必另外购买不含动物来源成分的转染试剂，一支搞定。Polyfectine成分相当稳定，对付各种细胞、各种转染规模，操作步骤都一样简单固定，不用去血清或者更换培养基，省时省事。

18、Polyfectine能用于动物体内转染吗？

答：是的！Polyfectine能有效的进行体内转染。同时也是基因治疗的理想非病毒载体，适用于将基因运送到不同的组织中。

19、需要对转染试剂进行优化，转染的起始指标是？

答：如果您希望取得最佳的转染效果，百恩维极力建议优化Polyfectine试剂的转染因素，最先，实验改变转染DNA的量（0.5, 0.75, 1.0, 1.5, 2.0 μg DNA每孔/24孔板），质量比为DNA：Polyfectine为2：1。在一个24孔板中测试各种DNA的浓度（每一个DNA浓度重复3次），一旦确定最佳DNA的浓度，可进一步改变质量比（1:1.5-1:4）

20、在第一次使用Polyfectine试剂转染一个特定的细胞株时，需对哪些因素作优化？    

         答：当首次使用Polyfectine试剂时，可对3个主要的因素做优化（以24孔培养版为例）：DNA与试剂的质量（N/P）比，一般为1:1.5-1:4。所用DNA的量,一般为0.5-1μg，酚/氯仿方法提取的DNA可能需要2μg。细胞接触试剂-DNA混合物的时间，一般为24-72小时。