人PL12抗体/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA试剂盒说明书
PL12抗体/抗丙氨酰tRNA合成酶试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中PL12抗体/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)水平。
PL12实验原理:
本试剂盒采用双抗原夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中人PL12抗体/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)。用纯化的人PL12抗体/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中PL12抗体/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的PL12抗体/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中人PL12抗体/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)的存在与否。
试剂盒组成:
试剂盒组成 |
48孔配置 |
96孔配置 |
保存 |
说明书 |
1份 |
1份 |
|
封板膜 |
2片(48) |
2片(96) |
|
密封袋 |
1个 |
1个 |
|
酶标包被板 |
1×48 |
1×96 |
2-8℃保存 |
阴性对照 |
0.5ml×1瓶 |
0.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
阳性对照 |
0.5ml×1瓶 |
0.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
酶标试剂 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
样品稀释液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
显色剂A液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
显色剂B液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
终止液 |
3ml×1瓶 |
6ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
浓缩洗涤液 |
(20ml×20倍)×1瓶 |
(20ml×30倍)×1瓶 |
2-8℃保存 |
PL12操作步骤:
1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液50μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
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