3． 按照细胞数量计算

酶活性定义：每10⁴个细胞每分钟氧化1nmol 底物ABTS 所需的酶量为一个酶活力单位（U）

漆酶活性（U/10⁴ cell）=△A÷(ε×d) ×V 反总÷(V 样×细胞数量÷V样总)÷T= 65×△A÷细胞数量

4． 按照液体体积计算

酶活性定义：每10⁴个细胞每分钟氧化1nmol 底物ABTS 所需的酶量为一个酶活力单位（U）

漆酶活性（U/L）=△A÷(ε×d) ×V 反总÷V 样÷T= 65000×△A

ε：ABTS 毫摩尔消光系数；36L/mmol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应总体积，0.7mL；V样：反应中样本体积，0.1mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W，样本质量，g；T:反应时间，3min

注意事项：

1. 工作液需临用前配制，并且尽快使用，4℃保存一周，若变色则不能使用。

2. 测定之前进行预实验，若吸光值较高，请将样品用提取液�行适当的稀释再测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。

产品名称: 漆酶活性检测试剂盒

产品英文名: Laccase Assay Kit

产品货号：BC1630        

产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼

产品商标：solarbio

简要介绍：

漆酶（CE1.10.3.2）是一种含铜的多酚氧化酶，属于铜蓝氧化酶家族，广泛分布于真菌和高等植物中，具有较强的氧化还原能力，在纸浆生物漂白，环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。
    漆酶分解产物ABTS 产生ABTS自由基，在420nm 处的吸光系数远大于底物ABTS，测定ABTS 自由基的增长速率，可计算得漆酶的活性。

产品详细描述

产品内容：

提取液：液体50mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：液体30mL×1 瓶，4℃保存。

工作液：粉剂×2 瓶，4℃避光保存，临用前加15mL 试剂一溶解。

产品说明：

漆酶（CE1.10.3.2）是一种含铜的多酚氧化酶，属于铜蓝氧化酶家族，广泛分布于真菌和高

等植物中，具有较强的氧化还原能力，在纸浆生物漂白，环境污染物降解和木质纤维素降解

以及生物检测方面有非常广泛的应用。

漆酶分解产物ABTS 产生ABTS自由基，在420nm 处的吸光系数远大于底物ABTS，测定

ABTS 自由基的增长速率，可计算得漆酶的活性。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。

操作步骤：

一、 酶液提取

1、 细胞：按照细胞数量（10⁴个）：提取液体积（ml）为500-1000:1 的比例（建议500万细胞加入1ml提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率30％或300W，超声3s，间隔7s，总时间3min），12000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、 组织：按照组织质量（g）：提取液体积（ml）为1:5-10 的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆；10000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3、 培养液：直接待检。

二、 测定操作表