慢性肾脏病（chronic kidney disease，CKD） 是全球公共健康问题^[1]，全球CKD患病率高达13.4%以上，呈现逐年上升的趋势^[2]。肾脏纤维化（Fibrosis）是形成CKD的关键病理原因，作为多数慢性肾脏病的终末期表现，如果放任纤维化的持续发展，会造成多器官功能障碍，最终导致多器官衰竭而亡，目前尚无有效治疗策略。为了深入研究肾脏纤维化的发病机制以及开发新的治疗方法，建立可靠的肾脏纤维化疾病模型至关重要。

TGF-β1重组蛋白常用来体外诱导人肾小管上皮细胞（HK-2），从而构建肾间质纤维化细胞模型。近岸蛋白提供高活性，高批间一致性的人TGF-β1重组蛋白，助力您的纤维化建模实验。

Measured by its ability to inhibit the IL-4-dependent proliferation of TF‑1 human erythroleukemic cells. The ED50 for this effect is 4-40 pg/ml.

临床上常见肺纤维化、肾纤维化、肝纤维化、心肌纤维化等病症，纤维化也是导致多种疾病发病率、死亡率升高的主要原因之一。尽管发病的病灶各不相同，其发病原因大同小异，均是由于胶原蛋白（collagen）、纤维粘连蛋白（fibronectin, FN）、α-平滑肌肌动蛋白（alpha-smooth muscle actin, α-SMA）等细胞外基质（extracellular matrix, ECM）过度堆积，导致成纤维细胞向肌成纤维细胞分化、炎症介质分泌增加，最终造成不可逆的器官纤维化。

TGF-β信号通路是驱动肾脏纤维化的核心机制，其通过配体（以TGF-β1和β3为主）与Ⅱ型受体（TGFR2）结合，激活经典Smad依赖通路：TGFR2反式磷酸化激活Ⅰ型受体（TGFR1），后者磷酸化Smad2/3并形成Smad2/3-Smad4三聚体复合物入核，直接调控靶基因表达^[3]。该通路通过多靶点促纤维化作用导致病理进展：一方面上调细胞外基质（ECM）合成基因（如胶原、纤连蛋白）并抑制其降解（抑制MMPs、促进TIMPs分泌），打破ECM代谢平衡；另一方面诱导肾系膜细胞增殖分化、内皮细胞肥大凋亡，并通过上皮/内皮-间充质转化（EMT/EndoMT）激活肌成纤维细胞，同时参与表观遗传修饰（如Smad3-HDAC复合物介导的基因甲基化）。这些机制协同促进ECM过度沉积、肌成纤维细胞积聚及组织瘢痕形成，最终引发肾小球硬化和肾小管间质纤维化，导致肾功能进行性衰竭^[5][6]。

图1 经典TGF-β-肾脏纤维化信号通路^[4]

1. 细胞培养：

   将HK-2细胞用含10%胎牛血清、100 U/mL青霉素、100 μg/mL链霉素的DMEM/F12 (1:1) 完全培养基，于37℃、5% CO₂ 细胞培养箱中培养。

2. 每隔 2-3天换新鲜培养基一次。

3. TGF-β1处理：

   HK-2细胞汇合度至80%，添加10 ng/mL TGF-β1重组蛋白（Cat.No.:CA59, 近岸蛋白），孵育48小时。

4. 细胞收集与鉴定：

   收集细胞，进行相关标志物鉴定。

   结果鉴定-上皮间质转化 (EMT) 的特征：

   上皮细胞标志物（如cytokeratins和E-cadherin）缺失。

   间充质细胞标志物（如N-cadherin、vimentin和纤连蛋白）的表达上调。