植物氨基糖苷类-3-磷酸转移酶（NPT）酶联免疫分析（ELISA）
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定植物组织，细胞及其它相关样本中氨基糖苷类-3-磷酸转移酶（NPT）含量。
实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物氨基糖苷类-3-磷酸转移酶（NPT）水平。用纯化的植物氨基糖苷类-3-磷酸转移酶（NPT）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入氨基糖苷类-3-磷酸转移酶（NPT），再与HRP标记的氨基糖苷类-3-磷酸转移酶（NPT）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的氨基糖苷类-3-磷酸转移酶（NPT）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中植物氨基糖苷类-3-磷酸转移酶（NPT）浓度。
试剂盒组成：
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试剂盒组成 |
48孔配置 |
96孔配置 |
保存 |
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说明书 |
1份 |
1份 |
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封板膜 |
2片（48） |
2片（96） |
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密封袋 |
1个 |
1个 |
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酶标包被板 |
1×48 |
1×96 |
2 |
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标准品：180 U/L |
0.5ml×1瓶 |
0.5ml×1瓶 |
2 |
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标准品稀释液 |
1.5ml×1瓶 |
1.5ml×1瓶 |
2 |
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酶标试剂 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
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样品稀释液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
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显色剂A液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
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显色剂B液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2 |
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终止液 |
3ml×1瓶 |
6ml×1瓶 |
2 |
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浓缩洗涤液 |
（20ml×20倍）×1瓶 |
（20ml×30倍）×1瓶 |
2 |
标本要求：
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤：
1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为120 U/L<