想做免疫荧光不会细胞爬片怎么行？-null-资讯-生物在线

我们在检测细胞蛋白定位或凋亡时（TUNEL），免不了要制作细胞爬片，细胞爬片的质量会影响最后的图片呈现效果及实验数据的准确性。今天小编教大家如何制作更好的细胞爬片。

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（一）爬片准备

1、爬片最好选用专用玻片。避免自己裁剪大小不一，以及玻璃的透明程度和吸附性都会影响最后的图片效果。

2、根据自己的需要选择合适大小的爬片，如6孔板、12孔板、24孔板。

3、选择好孔板和爬片，用镊子将爬片小心放到孔板中，注意无菌操作。放入玻片前，注意向孔板中滴加少量培养基，再放入玻片。目的是使培养皿与玻片间有更好的粘合力，避免出现在加入细胞悬液时玻片飘起，引起双层细胞贴片。

（二）细胞准备

1、如果是原代细胞，细胞分化时间较长，细胞分化好在进行接种，不要在孔板里进行分化。

2、如果是传代细胞，需胰酶消化细胞后对细胞计数，计算好铺孔密度重悬到培养基中。

3、根据自己的需求，将计算好的细胞，铺到孔板中。注意细胞不要太密，会影响后面拍照效果。

4、待细胞贴壁，可根据实验需要正常进行后面的药物干预等试验。

5、细胞实验结束后需要及时固定细胞来进行免疫荧光实验，避免细胞再进行代谢反应或死亡。

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