氨基反应型Protonex™ Green 500 SE（货号#21216）是一款专为与含氨基生物分子偶联设计的高性能pH传感染料，适用于构建定制化荧光pH探针偶联物。然而，其在实际应用中受限于较差的溶解性，尤其在疏水性或低极性体系中表现明显，一定程度上限制了标记效率与实验灵活性。

为克服这一局限，新开发的Protonex™ Green 500-PEG12 SE（货号#21219）在完全保留原始染料优异光谱特性与pH响应能力的基础上，通过引入亲水性PEG12连接臂，显著提升了探针的水溶性与生物相容性。两者具有完全一致的最大激发/发射波长、荧光量子产率及pH响应曲线，确保在不同实验体系中的信号可比性与方法延续性。改进后的Green 500-PEG12版本不仅溶解度大幅提高，还增强了在生理缓冲液中的稳定性，并降低与非特异性生物结构的吸附，更适合活细胞长时间成像及复杂生物样本中的pH监测。

Protonex™ Green 500系列染料展现出独特的“酸增强”型荧光响应特性：与常规在碱性条件下荧光增强的染料相反，该染料在酸性环境中荧光强度显著上升，且荧光信号随pH由中性向酸性过渡而持续增强。这一特性使其成为监测内体、溶酶体等酸性细胞器动态变化的理想工具。此外，探针在生理pH的细胞外环境中几乎不发出荧光，因此在进行活细胞实验时通常无需额外洗涤步骤，可直接进行成像或检测，简化操作流程并减少细胞扰动。

该系列探针已广泛应用于受体介导的内吞研究、自噬与溶酶体功能分析、肿瘤微环境酸性监测及药物递送系统的pH响应评估等领域，为细胞器特异性pH成像与定量分析提供了可靠、灵敏且操作便捷的荧光工具。