布氏杆菌（Bb）IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

使 用 说 明（48T/96T）

作者： 江彬

Tel : 1991-4747-194

[原理]

本试剂盒采用亲和素-生物素化布氏杆菌（Bb）抗原预包被板ELISA 原理，检测人血清/血浆中存在的布氏杆菌IgG型抗体，并配以酶标记抗人IgG单克隆抗体作为标记物。加入底物TMB显色后终止反应，在450nm波长测各孔O.D值，O.D值的大小与待检抗体含量成正比。生物素系统（biotin-avidin system）的稳固级联放大作用，使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高是本试剂盒之独特点。

[用途]

本试剂盒用于定性检测人血清/血浆中的布氏杆菌（Bb）IgG型抗体。对布氏杆菌既往感染状况的诊断具有重要参考价值。

[试剂盒组成]

1、生物素化抗原预包被板 1块（4X12/8X12）

2、阴性对照 1瓶

3、阳性对照 1瓶

4、标本稀释液 1瓶（10/20ml，直接使用）

5、酶结合物 1瓶（5/12ml，直接使用）

6、30X浓缩洗液

1瓶（20/10ml，加蒸馏水1：30稀释使用）

7、显示剂A、B液 各1瓶（3/5ml）

8、终止液（2M H₂SO₄） 1瓶（3/5ml）

9、说明书 1份

[操作步骤]

1、将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封后置于板架上。

2、加样：用标本稀释液以1：41(5ul-200ul)稀释待检血清标本后，取100ul加入到反应板孔中，分别加阴阳性对照各100ul于反应板中，并设空白对照一孔（加100ul标本稀释液）。

3、37 ℃ 温育 30 分钟。甩去孔内液体，用洗涤液洗板 3 次并在吸水纸上拍干。

4、加酶结合物：每孔 2 滴（或100ul），混匀后置 37 ℃ 温育 30 分钟。同上法洗涤 3 次并拍干。

5、显色：每孔加显色剂A、B各1滴（或各50ul），轻拍混匀（或震荡器混匀）后置 37 ℃ 10 分钟。

[结果判断]

1、目测：在白色背景下观察各孔显**况，兰色者为阳性，无色者为阴性。

2、酶标仪测定：每孔加终止液1滴（或50ul），混匀后在450nm下测定各孔O.D值。

（1）P/N=标本O.D值/ 阴性对照O.D值。

（2）P/N≥2.1为阳性；

（3）1.5≤P/N<2.1为可疑标本; P/N<1.5为阴性。

（4）阴性对照(NC)小于0.10时以0.10计, 大于0.1小于0.21时以实际O.D值计算;若大于0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。

（5）阳性对照(PC)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。

[注意事项]

1、 微孔板须密封防潮，从冷藏环境中取出时，应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用，余者封存置2-8℃。

2、滴加试剂前应将液体翻转数次混匀，滴加时保持瓶身垂直。

3、洗涤时每孔均须加满，防止孔内有游离酶不能洗净。

4、试剂置2-8℃存放，不能冻结，有效期10个月。

5、避免用溶血、混浊或脂血标本。

6、最好用新鲜标本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周（样本应避光）。