伤寒杆菌（St） IgM 抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
使 用 说 明(96T/48T)
作者： 江彬
[原理]
本试剂盒采用亲和素-生物素化St-抗原(以“O”、“H”为主)预包被板ELISA 原理，检测人血清/血浆中存在的 St-IgM 抗体，并配以酶标记抗人IgM u 链单克隆抗体作为标记物。加入底物TMB显色后终止反应，在450nm波长测各孔O.D值，O.D值的大小与待检抗体含量成正比。生物素系统（biotin-avidin system）的稳固级 联放大作用，使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高。
[用途]
本试剂盒用于定性检测人血清/血浆中的伤寒杆菌（St）IgM抗体，对伤寒沙门属菌早期感染的诊断有重要的价值；比肥达氏反应灵敏、特异、简便。
[试剂盒组成]
1、生物素化抗原预包被板 1块（8X12/4X12） 2、阴性对照血清 1瓶（不稀释）
3、阳性对照血清 1瓶（不稀释）
4、标本稀释液 1瓶（20 ml/10ml，）
5、酶结合物 1瓶（10ml/5ml，直接使用）
6、30X浓缩洗液
1瓶（20ml/10ml，加蒸馏水1：30稀释使用）
7、显示剂A、B液 各1瓶（5/2.5ml）
8、终止液（2M H2SO4） 1瓶（5/2.5ml）
9、说明书 1份
[操作步骤]
1. 将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封后置于板架上。
2. 样本稀释：用标本稀释液以1：101（2ul—200ul）稀释标本（即先加200ul标本稀释液于板孔中，再
分别加入2ul待检血清于各孔中混匀）。设阴、阳性对照（各100ul）及空白对照（加100ul标本稀释液）各一孔。轻拍混匀。
3. 37℃温育30分钟。甩去孔内液体，用洗涤液洗板3次并在吸水纸上拍干。
4. 加酶结合物：每孔2滴，混匀后置37℃温育30分钟。同上法洗涤3次并拍干。
5. 显色：每孔加显色剂A、B各一滴，轻拍混匀（或震荡器混匀）后置37℃10分钟。
[结果判断]
1．目测：在白色背景下观察各孔显**况，兰色者为阳性，无色者为阴性。
2．酶标仪测定：每孔加终止液一滴，混匀后在450nm下测定各孔O.D值。
① P/N=标本O.D值/阴性对照O.D值。
② P/N≥2.1为阳性；
③ 1.5≤P/N<2.1为可疑标本; P/N<1.5为阴性 。
④ 阴性对照(NC)小于0.10时以0.10计, 大于0.1小于0.21时以实际O.D值计算;若大于0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。
⑤ 阳性对照(PC)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。
[注意事项]
1． 微孔板须密封防潮，从冷藏环境中取出时，应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用，余者封存置2-8℃。
2． 滴加试剂前应将液体翻转数次混匀，滴加时保持瓶身垂直。
3． 洗涤时每孔均须加满，防止孔内有游离酶不能洗净。
4． 试剂置2-8℃存放，不能冻结，有效期10个月。
5． 避免用溶血、混浊或脂血标本。
6． 最好用新鲜标本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周（样本应避光）。
7． 本试剂盒标本稀释液中含有抗干扰因子，可彻底消除聚合人IgG或RF所致假阳性。